تحليل الفيتامينات

تقسم الطوق المستخدمة للكشف عن الفيتامينات وتعيينها إلى:

أ. الطرق الكيميائية: وتشد على تفاعلات متخصصة للطبيعة الكيميائية للفيتامينات

ب. الطرق الفيزيائية: تعيين بعض الثوابت وكمثال الانطفائية  Extinction  قمة طيف الامتصاص.

ج. الطرق الحياتية: ويمكن التكهن بأن الطرق الكيميائية غالبا ما تتأثر بوجود مواد أخرى مقاربة بالتركيب الكيميائي للفيتامين المراد تعيينه ولكنها لا تمتلك فعالية حياتية. إن استخدام الطرق الكيميائية محدود بطبيعة الحال على الرغم من أن الكروماتوكرافي وكمثال كروماتوكرافي الامتزاز تسمح بإزالة بعض المواد غير المرغوب فيها. أما استخدام الطرق الفيزيائية لتعيين الفيتامينات فإنه يتطلب تنقيتها وكمثال عند قياس الامتصاص الضوئي.

غالبا ما تستخدم اختبارات إضافة المعيار Standard  addition للتعيين الكيميائي أو الفيزيائي الكيميائي للفيتامينات حيث تضاف كمية معلومة من الفيتامين إلى النموذج ويجب أن تكون الكمية المضافة مقاربة إلى الكمية الموجودة في النموذج، ثم يتم تعيين الفيتامين في النموذج الرئيسي والنموذج المضاف إليه المعيار مع مراعاة إجراء الاختبار في الوقت ذاته وتحت الظووف نفسها.

إن الطرق الحياتية لتعيين الفيتامينات لا تزال الطرق الأساسية لتعيين طبيعة وكمية الفيتامين ويمكن إجراؤها على الحيوانات بمثابة اختبارات انتقائية أو شافية وكمثال بصيفة اختبار النمو، اختبار الكساح اختبار الإسقربوط أو اختبار البروثرومبين، ومن مساوئ الطرق الحياتية (تجارب الحيوانات) الزمن الطويل الذي تستهلكه والنسبة العالية للخطأ واستهلاك كميات كبيرة من الفيتامينات، ويستخدم حالية على نطاق واسع الاختبارات الحياتية المجهرية وخصوصا لمجموعة فيتامين B إذ تستخدم بعض الأحياء المجهرية مثل البكتيريا أو الخمائر والاعفان التي تحتاج إلى هذه الفيتامينات لنموها وتنشيطها عند إضافة الكمية الملائمة لها. وتتناسب كمية الفيتامين المضافة مع الزيادة في إعداد الخلايا.

إن الطرق الحياتية المجهرية للاختبار أكثر خصوصية من الطرق الفيزيائية الكيميائية وتتطلب وقتا أقصر ومواد أقل.

لقد كانت الوحدات المستخدمة لقياس تركيز الفيتامينات هي الوحدات الدولية (I.U) وتحدد هذه بالطرق الحياتية (باستخدام الحيوانات) في ظروف معيارية دقيقة، إلا أنه بعد معرقة التراكيب الكيميائية للفيتامينات وإمكانية تحضيرها بصيفة نقية أصبح من الممكن حساب الكمية الحقيقية للفيتامين، الموجودة في الوحدة العالمية.

جدول 1-1: محتوى بعض الفيتامينات في الأغذية، تمثل الأرقام ما موجود في وزن 100 غم من الغذاء القابل للأكل