فصل الانزيمات بتقنية كروموتوغرافيا الألفة حيث تتعرف اليجندات على مناطق نوعية في الإنزيمات |
1583
01:51 صباحاً
التاريخ: 2-6-2021
|
أقرأ أيضاً
التاريخ: 15-7-2021
2051
التاريخ: 1-6-2021
2158
التاريخ: 29-6-2021
1420
التاريخ: 7-6-2021
1428
|
فصل الانزيمات بتقنية كروموتوغرافيا الألفة حيث تتعرف اليجندات على مناطق نوعية في الإنزيمات
تتمثل الخاصة الأبرز للاستشراب بالألفة (Affinity chromatography) في قدرته على النزع الانتقائي لبروتين معين واحد أو لعدد صغير من بروتينات معينة موجودة في مزيج بروتيني معقد. وتستخدم الطريقة لجيناً (Ligand) ثابتاً (غير متحرك) يتاثر نوعيا مع الإنزيم المطلوب تنقيته. وعندما يعرض مزيج البروتينات إلى هذا اللجين (الليجند)، ترتبط معه فقط تلك البروتينات التي تتاثر بقوة معه؛ أما البروتينات غير المرغوبة فتعبر العمود وتطرح مباشرة خارجه. يشطف بعد ذلك البروتين المرغوب عن اللجين المثبت باستخدام تركيز مرتفع من الملح أو الشكل الذواب للجين. وتكون عمليات التنقية المنجزة بطرق الاستشراب بالألغة فعالة، وتتفوق على التطبيق الناجح للطرق المدرسية الكثيرة.
ومن اللجائن المفضلة في هذه التقنية نذكر مشتقات الركائز أو التمائم الإنزيمية أو الأصبغة العضوية (Organic dyes) التي تعمل كمضاهيات نوكليوتيدية أو تميمية مرتبطة تساهميأ بدعامة خاملة (مثل سيفاديكس الدنا (DNA-Sefadex) أو السيفاروز الأزرق). وترتبط هذه اللجائن بالدعامة بواسطة جزيء رابط (Linker) يبلغ طوله 3-8 ذرات كربون ولكن يكن أن يعيق «الرابط» الكاره لمماء الفصل بإدخال عنصر الاستشراب باللجين الكاره للماء (انظر لاحقاً). ومن الأمثلة على نجاح الاستشراب بالألفة تنقية الكثير من نازعات الهيدروجين المختلفة على دعائم ذات ألفة للناد (+NAD). وفي حين أن الكثير من نازعات الهيدروجين يكن أن ترتبط وتشطف معاً عند معالجة العمود بالناد (+NAD) الذواب، فإن الاستعمال اللاحق لدعائم أليفة للركيزة (وليس التلميم الإنزيمي) أو الشطف باستخدام ((مزيج ثلاثي مجهض» (Abortive ternary mixture) لنا" واحد وركيزة واحدة قد أثبتئا نجاحهما في العديد من اكالات.
في الاستشراب باللجائن الكارهة للماء، يربط المركب الهيدروكربوني الألكيلي (Alkyl) أو الأريلي (Aryl) بدعامة مثل السفاديكس، ويشمل استبقاء البروتينات على هذه الدعائم تاثرات كارهة للماء بين الألكيل ومناطق من البروتين كارهة للماء أيضأ. وتوضع البروتينات في محاليل تحتوى على تركيز مرتفع من ملح ما (مثل سلفات الأمونيوم)، وتشطف بمداريج متناقصة من الملح نفسه.
|
|
طبيبة تبدد 5 خرافات رئيسية عن تغذية الأطفال
|
|
|
|
|
وفاة أول رجل خضع لزراعة كلية خنزير.. والمستشفى يوضح الأسباب
|
|
|
|
قبل افتتاحها بايام.. شاهد بالصور اكاديمية الثقلين للتوحد واضطرابات النمو في البصرة
|
|
قبل ايام من افتتاحه.. لقطات حصرية توثق اللمسات الاخيرة لإنجاز أحدث مستشفى لعلاج السرطان في البصرة تابع للعتبة الحسينية (صور)
|
|
بالصور: طلبة وطالبات الجامعات التابعة للعتبة الحسينية يؤدون الامتحانات النهائية
|
|
الأمين العام للعتبة الحسينية: تبني مشروع تأسيس هيئة التعليم التقني يأتي لحاجة العراق الماسة إلى الربط بين الجانبين النظري والعملي
|